熒光原位雜交儀酵母雙雜交系統(tǒng)

熒光原位雜交儀酵母雙雜交系統(tǒng)（Y2H)原理：

傳統(tǒng)Y2H檢測的原理是利用報(bào)告基因，其激活依賴于特定的轉(zhuǎn)錄因子。具體而言，待測蛋白質(zhì)X和Y分別與 DNA 結(jié)合域 (BD) 和轉(zhuǎn)錄因子的激活域 (AD) 融合。BD-X 融合蛋白與報(bào)告基因啟動子的上游激活子序列 (UAS) 結(jié)合。在X和Y之間相互作用時(shí)，AD將被募集到啟動子，并重建功能性轉(zhuǎn)錄因子，從而觸發(fā)報(bào)告基因的后續(xù)轉(zhuǎn)錄]

作為一種基因技術(shù)，酵母雙雜交篩選提供了一種敏感且經(jīng)濟(jì)的方法來測試兩個(gè)目標(biāo)蛋白之間的直接相互作用，或使用蛋白質(zhì)作為誘餌來篩選從所需的細(xì)胞類型、組織或整個(gè)生物體制備的蛋白質(zhì)片段庫。通過測序所選酵母菌菌落中相應(yīng)的質(zhì)粒，確定相互作用。   

實(shí)驗(yàn)步驟：

①創(chuàng)建BD-X誘餌；②通過BD-X誘餌測試自我激活；③執(zhí)行酵母雙雜交篩選和識別獵物

 Y2H檢測服務(wù)：

為了研究大量蛋白質(zhì)的相互作用，科學(xué)家根據(jù)Y2H系統(tǒng)，開發(fā)了幾種系統(tǒng)以適應(yīng)不同蛋白質(zhì)的不同亞細(xì)胞定位和生化特征。KMD  Bioscience為客戶提供多種系統(tǒng)的服務(wù)，以適應(yīng)不同項(xiàng)目的不同需求。

● 酵母單雜交系統(tǒng)：研究蛋白質(zhì)-DNA下相互作用

圖2 Y1H原理示意圖

● 酵母三雜交系統(tǒng)：研究第三成分介導(dǎo)的蛋白質(zhì)的相互作用

圖3 Y3H原理示意圖

● 分裂泛素Y2H系統(tǒng)：用于研究膜蛋白

客戶提供：

--不少于2? 的質(zhì)粒（含誘餌靶基因）

--該基因的DNA序列，以便我們設(shè)計(jì)合成方案，進(jìn)行人工合成（需收費(fèi)）

交付內(nèi)容：

--陽性克隆若干及DNA測序結(jié)果

--每個(gè)陽性克隆不少于2? 質(zhì)粒

實(shí)驗(yàn)周期：約6-8周